5301星形細胞培養(yǎng)基是一種專門用于星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)的無菌服務、液體培養(yǎng)基像一棵樹,通常包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基協同控製、胎牛血清、生長因子高效利用、抗生素等成分體驗區。
5301星形細胞培養(yǎng)基使用規(guī)范:
1.細胞接種
細胞密度:星形細胞接種密度根據(jù)細胞代次和狀態(tài)調(diào)整。
預(yù)處理:接種前用培養(yǎng)基預(yù)潤培養(yǎng)瓶/皿品質,避免細胞干燥損傷提供了遵循。
2.培養(yǎng)條件
溫度:37℃恒溫培養(yǎng)。
氣體環(huán)境:5%CO2(維持pH穩(wěn)定)能運用,部分星形細胞可能需要低氧條件利用好。
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基參與水平,避免代謝產(chǎn)物積累導(dǎo)致細胞毒性。
3.傳代與凍存
消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化有望,血清終止消化智能設備。
凍存:使用含10%DMSO的凍存培養(yǎng)基,程序降溫后轉(zhuǎn)入-80℃或液氮保存服務效率。
5301星形細胞培養(yǎng)基注意事項:
1.避免污染
操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘不要畏懼,佩戴手套和口罩。
開封的培養(yǎng)基需在1個月內(nèi)用完蓬勃發展,避免反復(fù)凍融(可分裝為單次用量)作用。
2.血清質(zhì)量控制
胎牛血清需經(jīng)過檢測(如支原體、病毒問題、內(nèi)毒素)應用的選擇,熱滅活可滅活補體成分。
不同批次血清可能影響細胞狀態(tài),建議批量采購并測試大大縮短。
3.生長因子保存
bFGF/EGF需分裝為小劑量,-20℃保存開放要求,避免反復(fù)凍融失效高質量。
4.特殊需求調(diào)整
原代細胞培養(yǎng):可能需要添加更高濃度血清或基質(zhì)包被。
分化誘導(dǎo):去除生長因子并添加低血清可誘導(dǎo)星形細胞分化緊密相關。
