1.培養(yǎng)基選擇：

　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)選擇合適的培養(yǎng)基投入力度。例如：

　　增殖階段：使用含F(xiàn)GF-2和EGF的基礎(chǔ)培養(yǎng)基效果。

　　分化階段：使用不含F(xiàn)GF-2和EGF的培養(yǎng)基，添加分化誘導(dǎo)因子技術。

　　市售培養(yǎng)基可直接使用改善，但需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求補(bǔ)充特定成分。

　　2.分裝與保存：

　　培養(yǎng)基應(yīng)無(wú)菌分裝最新，避免反復(fù)凍融發揮重要作用。可小量分裝模樣，-20℃保存取得顯著成效。

　　添加易降解成分時(shí)處理方法，建議現(xiàn)用現(xiàn)加。

　　3.器材準(zhǔn)備：

　　使用無(wú)菌培養(yǎng)皿責任、培養(yǎng)板（如多孔板）或培養(yǎng)瓶服務，預(yù)先包被細(xì)胞外基質(zhì)（如層粘連蛋白、多聚鳥氨酸）持續向好。

　　準(zhǔn)備移液器舉行、離心管、PBS緩沖液等無(wú)菌耗材不容忽視。

　　二習慣、神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基注意事項(xiàng)

　　1.無(wú)菌操作：

　　所有操作需在超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行，避免污染深入各系統。

　　培養(yǎng)基開封后盡快使用大型，未用完的培養(yǎng)基不可倒回原瓶的可能性。

　　2.避免機(jī)械損傷：

　　輕柔操作進一步推進，避免劇烈搖晃或吹打細(xì)胞，以免損傷細(xì)胞膜或破壞分化中的突觸系列。

　　3.pH與滲透壓：

　　培養(yǎng)基的pH需控制在7.2～7.4明確相關要求，滲透壓應(yīng)接近生理范圍。

　　使用前可通過(guò)pH計(jì)或滲透壓儀檢測(cè)方案。

　　4.細(xì)胞外基質(zhì)包被：

　　包被培養(yǎng)板時(shí)特點，層粘連蛋白或多聚鳥氨酸需孵育足夠時(shí)間，然后吸去多余液體統籌發展。

　　包被后的板子需干燥后使用品質，避免殘留液體影響細(xì)胞貼壁。

　　5.記錄與優(yōu)化：

　　詳細(xì)記錄培養(yǎng)基配方慢體驗、細(xì)胞密度深化涉外、換液頻率、分化因子濃度等參數(shù)左右。

　　根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和分化效率調(diào)整培養(yǎng)基成分（如生長(zhǎng)因子濃度又進了一步、添加劑種類）。

　　三物聯與互聯、神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基常見問題與解決方法

　　1.細(xì)胞不分化：

　　檢查是否撤除了FGF-2/EGF狀況。

　　確保分化誘導(dǎo)因子的濃度和活性。

　　確認(rèn)細(xì)胞外基質(zhì)包被是否成功取得了一定進展。

　　2.細(xì)胞大量死亡：

　　檢查培養(yǎng)基是否過(guò)期或污染業務。

　　確保氣體環(huán)境和滲透壓正常。

　　減少換液時(shí)的機(jī)械損傷有所增加。

　　3.分化不均一：

　　優(yōu)化細(xì)胞接種密度和分化誘導(dǎo)因子濃度完善好。

　　延長(zhǎng)分化時(shí)間或調(diào)整培養(yǎng)基配方（如添加抗氧化劑）。